微生物實(shí)驗室是生物學(xué)領(lǐng)域必備實(shí)驗室。如何配置才能成就一個(gè)完備的微生物實(shí)驗室,哪些儀器必不可少,哪些儀器可有可無(wú)?
(1)超凈工作臺
微生物的培養都是在特定培養基中進(jìn)行無(wú)菌培養,那么無(wú)菌培養必然需要超凈工作臺提供一個(gè)無(wú)菌的工作環(huán)境。超凈工作臺的用途是微生物的接種及處理時(shí)的無(wú)菌操作。
(2)培養箱
培養箱有多種類(lèi)型,它的作用在于為微生物的生長(cháng)提供一個(gè)適宜的環(huán)境。 培養箱有多種類(lèi)型,包括生化培養箱,霉菌培養箱,厭氧培養箱等。具體來(lái)說(shuō)區別如下: a. 生化培養箱只能控制溫度??勺鳛橐话慵毦钠桨迮囵B。 b. 霉菌培養箱可以控制溫度和濕度??勺鳛槊咕呐囵B。 c. CO2培養箱適用于厭氧微生物的培養,例如雙歧桿菌。
(3)天平
天平用于精確稱(chēng)量各類(lèi)試劑。實(shí)驗室常用的是電子天平,電子天平按照精度不同有不同的級別。
(4)微生物均質(zhì)器
用于從固體樣品中提取細菌。用微生物均質(zhì)器制備微生物檢測樣本具有樣品無(wú)污染、無(wú)損傷、不升溫、不需要滅菌處理,不需洗刷器皿等特點(diǎn),是微生物實(shí)驗中使用較為方便的儀器。
(5)菌落計數器
菌落計數儀可協(xié)助操作者計數菌落數量。通過(guò)放大,拍照,計數等方式準確的獲取菌落的數量。有些高性能的菌落計數器還可連接電腦完成自動(dòng)計數的操作。
(6)微波爐/電爐
用于溶液的快速加熱,微生物固體培養基的加熱溶化。
(7)高壓滅菌鍋
(7)高壓滅菌鍋
微生物學(xué)所用到的大部分實(shí)驗物品、試劑、培養基都應嚴格消毒滅菌。滅菌鍋也有不同大小型號,有些是手動(dòng)的,有些是全自動(dòng)的。用戶(hù)需要根據自己的需要選購。
(8)移液器
液體量器用于精密量取各類(lèi)液體。常見(jiàn)的液體量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯。
(9)冰箱
冰箱是實(shí)驗室保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學(xué)實(shí)驗中用到的試劑有些要求是4度保存,有些要求是負20度保存,實(shí)驗人員一定要看清試劑的保存條件,放置在恰當的溫度下保存。具體來(lái)說(shuō),不同溫度下保存的物品如下: a. 4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。 b. -20℃適用于某些試劑、藥品、配好的抗生素等。 c. -80℃適合某些長(cháng)期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、感受態(tài)等的保存。
(10)生物安全柜
微生物實(shí)驗中涉及的試劑和樣品微生物有些是有毒的,對于操作人員來(lái)說(shuō)傷害較大。為了防止有害懸浮微粒、氣溶膠的擴散,可以利用生物安全柜對操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環(huán)境提供安全保護。
(11)搖床
(11)搖床
搖床是實(shí)驗室常用的一種儀器,在微生物實(shí)驗操作過(guò)程中,液體培養基培養細菌時(shí)需要在特定溫度下振蕩使用。
(12)純水裝置
純水裝置包括蒸餾水器和純水機。蒸餾水器的價(jià)格便宜,但在造水過(guò)程中需要有人值守;純水機價(jià)格高些,但是使用方便,可以?xún)Υ嬉欢康募兯?。純水使用也有不同的級別,實(shí)驗中配制試劑,配制培養基均需用純水。
(13)生物顯微鏡
由于微生物體積較小,所以在觀(guān)察時(shí)需要借助生物顯微鏡。生物顯微鏡用于微生物和微小物品結構,形態(tài)等的觀(guān)察。
(14)冷凍干燥機
(14)冷凍干燥機
主要適用于細菌、微生物、酵母等的干燥。用于干燥保存易脫水的產(chǎn)品,在加水以后能夠再次恢復原材料的特性,不影響其生物活性等。通過(guò)冷凍干燥,細菌之類(lèi)的材料成為干燥狀態(tài),從而不會(huì )發(fā)生化學(xué)改變。
(15)分光光度計
分光光度計在微生物試驗中用于測定微生物懸液的濃度,可以正確選取合適的培養時(shí)間。一般是在600nm波長(cháng)測定菌液濃度。
(16)恒溫干燥箱
恒溫干燥箱是用于滅菌和洗滌后的物品烘干。烘箱有不同的控溫范圍,用戶(hù)可以根據實(shí)驗需求進(jìn)行選擇。例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進(jìn)行烘干,一般玻璃用具的烘干可以選擇60℃。
(17)恒溫水浴鍋
水浴鍋是一種控溫裝置,水浴控溫對于樣品來(lái)說(shuō)比較快速且接觸充分。有些微生物反應需要在37度,42度,56度下水浴進(jìn)行,所以恒溫水浴鍋可以提供需要的溫度。
(18)酸度計
用于配置試劑時(shí)精確測量PH值,從而保證配置的溶液的精確性。有時(shí)也需要利用pH計測定樣品溶液的酸堿度。
(19)離心機
用于收集微生物菌體以及其他沉淀物。離心機有冷凍和常溫之分。有些樣品由于在常溫下不太穩定,需要低溫環(huán)境,要視樣品的種類(lèi)而定。
(20)液氮罐
液氮罐儲存液氮,可用于細菌、酵母、霉菌和大型真菌等各種微生物的長(cháng)期保存。以上介紹的是微生物實(shí)驗室的基本儀器配置,在組建實(shí)驗室時(shí)還需要其他一些耗材,例如酒精燈,試管架,三角瓶,量筒,玻璃試管,滅菌吸管,涼干架,剪刀,鑷子,脫脂棉,紗布,試管筐,無(wú)菌采樣及稱(chēng)樣袋,接種環(huán),過(guò)濾器等。實(shí)驗人員可以根據自己的需求為微生物實(shí)驗室配置合適的儀器和耗材。
微生物實(shí)驗室管理制度
一、實(shí)驗室管理制度
1.實(shí)驗室應制定儀器配備管理、使用制度,藥品管理、使用制度,玻璃器皿管理、使用制度,并根據安全制度和環(huán)境條件的要求,本室工作人員應嚴格掌握,認真執行。
2.進(jìn)入實(shí)驗室必須穿工作服,進(jìn)入無(wú)菌室換無(wú)菌衣、帽、鞋,戴好口罩,非實(shí)驗室人員不得進(jìn)入實(shí)驗室,嚴格執行安全操作規程。
3.實(shí)驗室內物品擺放整齊,試劑定期檢查并有明晰標簽,儀器定期檢查、保養、檢修, 嚴禁在冰箱內存放和加工私人食品。
4.各種器材應建立請領(lǐng)消耗記錄,貴重儀器有使用記錄,破損遺失應填寫(xiě)報告;藥品、器材、菌種不經(jīng)批準不得擅自外借和轉讓?zhuān)坏盟阶阅贸觥?/span>
5.禁止在實(shí)驗室內吸煙、進(jìn)餐、會(huì )客、喧嘩,實(shí)驗室內不得帶入私人物品,離開(kāi)實(shí)驗室前認真檢查水電,對于有毒、有害、易燃、污染、腐蝕的物品和廢棄物品應按有關(guān)要求執行。
6.負責人嚴格執行本制度,出現問(wèn)題立即報告,造成病原擴散等責任事故者,應視情節直至追究法律責任。
二、儀器配備、管理使用制度
二、儀器配備、管理使用制度
1.食品微生物實(shí)驗室應具備下列儀器:培養箱、高壓鍋、普通冰箱、低溫冰箱、厭氧培養設備、顯微鏡、離心機、超凈臺、振蕩器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷凍干燥設備、勻質(zhì)器、恒溫水浴箱、菌落計數器、生化培養箱,電位 pH計、高速離心機。
2.實(shí)驗室所使用的儀器、容器應符合標準要求,保證準確可靠,凡計量器具須經(jīng)計量部門(mén)檢定合格方能使用。
3.實(shí)驗室儀器安放合理,貴重儀器有專(zhuān)人保管,建立儀器檔案,并備有操作方法,保養、維修、說(shuō)明書(shū)及使用登記本,做到經(jīng)常維護、保養和檢查,精密儀器不得隨意移動(dòng),若有損壞需要修理時(shí),不得私自拆動(dòng)、應寫(xiě)出報告、通知管理人員,由經(jīng)理同意填報修理申請、送儀器維修部門(mén)。
4.各種儀器(冰箱、溫箱除外),使用完畢后要立即切斷電源,旋鈕復原歸位,待仔細檢查后,方可離去。
5.一切儀器設備未經(jīng)設備管理人員同意,不得外借,使用后按登記本的內容進(jìn)行登記。
6.儀器設備應保持清潔,一般應有儀器套罩。
7.使用儀器時(shí),應嚴格按操作規程進(jìn)行,對違反操作規程的因管理不善致使儀器械損壞,要追究當事者責任。
三、藥品管理、使用制度
1.依據本室檢測任務(wù),制定各種藥品試劑采購計劃,寫(xiě)清品名、單位、數量、純度、包裝規格,出廠(chǎng)日期等,領(lǐng)回后建立賬目,專(zhuān)人管理,每半年做出消耗表,并清點(diǎn)剩余藥品。
2.藥品試劑陳列整齊,放置有序、避光、防潮、通風(fēng)干燥,瓶簽完整,劇毒藥品加鎖存放、易燃、揮發(fā)、腐蝕品種單獨貯存。
3.領(lǐng)用藥品試劑,需填寫(xiě)請領(lǐng)單、由使用人和室負責人簽字,任何人無(wú)權私自出借或饋送藥品試劑,本單位科、室間或外單位互借時(shí)需經(jīng)科室負責人簽字。
4.稱(chēng)取藥品試劑應按操作規范進(jìn)行,用后蓋好,必要時(shí)可封口或黑紙包裹,不使用過(guò)期或變質(zhì)藥品。
四、玻璃器皿管理、使用制度
1.根據測試項目的要求,申報玻璃儀器的采購計劃、詳細注明規格、產(chǎn)地、數量、要求,硬質(zhì)中性玻璃儀器應經(jīng)計量驗證合格。
2.大型器皿建立賬目,每年清查一次,一般低值易耗器皿損壞后隨時(shí)填寫(xiě)損耗登記清單。
3.玻璃器皿使用前應除去污垢,并用清潔液或2%稀鹽酸溶液浸泡24 h后,用清水沖洗干凈備用。
4.器皿使用后隨時(shí)清洗,染菌后應嚴格高壓滅菌,不得亂棄亂扔。
五、安全制度
五、安全制度
1.進(jìn)入實(shí)驗室工作衣、帽、鞋必須穿戴整齊。
2.在進(jìn)行高壓、干燥、消毒等工作時(shí),工作人員不得擅自離現場(chǎng),認真觀(guān)察溫度、時(shí)間,蒸餾易揮發(fā)、易燃液體時(shí),不準直接加熱,應置水浴鍋上進(jìn)行,試驗過(guò)程中如產(chǎn)生毒氣時(shí)應在避毒柜內操作。
3.嚴禁用口直接吸取藥品和菌液,按無(wú)菌操作進(jìn)行,如發(fā)生菌液、病原體濺出容器外時(shí),應立即用有效消毒劑進(jìn)行徹底消毒,安全處理后方可離開(kāi)現場(chǎng)。
4.工作完畢,兩手用清水肥皂洗凈,必要時(shí)可用新潔爾滅、過(guò)氧乙酸泡手,然后用水沖洗,工作服應經(jīng)常清洗,保持整潔,必要時(shí)高壓消毒。
5.實(shí)驗完畢,即時(shí)清理現場(chǎng)和實(shí)驗用具,對染菌帶毒物品,進(jìn)行消毒滅菌處理。6.每日下班,尤其節假日前后認真檢查水、電和正在使用的儀器設備,關(guān)好門(mén)窗,方可離去。
六、環(huán)境條件要求
1.實(shí)驗室內要經(jīng)常保持清潔衛生,每天上下班應進(jìn)行清掃整理,桌柜等表面應每天用消毒液擦拭,保持無(wú)塵,杜絕污染。2.實(shí)驗室應井然有序,不得存放實(shí)驗室外及個(gè)人物品、儀器等,實(shí)驗室用品要擺放合理,并有固定位置。
3.隨時(shí)保持實(shí)驗室衛生,不得亂扔紙屑等雜物,測試用過(guò)的廢棄物要倒在固定的箱筒內,并及時(shí)處理。
4.實(shí)驗室應具有優(yōu)良的采光條件和照明設備。
5.實(shí)驗室工作臺面應保持水平和無(wú)滲漏,墻壁和地面應當光滑和容易清洗。
6.實(shí)驗室布局要合理,一般實(shí)驗室應有準備間和無(wú)菌室,無(wú)菌室應有良好的通風(fēng)條件,如安裝空調設備及過(guò)濾設備,無(wú)菌室內空氣測試應基本達到無(wú)菌。
7.嚴禁利用實(shí)驗室作會(huì )議室及其他文娛活動(dòng)和學(xué)習場(chǎng)所。
微生物實(shí)驗操作中注意事項
1.由被檢驗標本或培養物中取材觀(guān)察細菌形態(tài)時(shí),必須使用接種環(huán)。接種環(huán)系采用一段長(cháng)約5 ~8cm 硬度適中的鎳質(zhì)電阻絲或特制鉑絲,安置在一金屬或玻璃棒上制成。無(wú)環(huán)者則稱(chēng)接種針。
2.接種環(huán)或接種針每次使用前后,均須火焰滅菌。即在乙醇燈火焰上徹底燒灼1 次,金屬棒或玻璃棒部分亦須轉動(dòng)著(zhù)通過(guò)火焰3 次,用后燒灼時(shí),先將近環(huán)處鎳絲置于火焰中,使熱導向接種環(huán),如直接將環(huán)燒灼,則環(huán)上殘余菌液可因突然受高熱而爆烈四濺,有傳染危險。待環(huán)上菌液蒸發(fā)干涸后,再將接種環(huán)以垂直方向于火焰中燒灼滅菌,后再將金屬棒或玻璃棒部分往復通過(guò)火焰。接種針用后滅菌時(shí)與接種環(huán)同。
3.接種環(huán)(針)經(jīng)火焰后,需待冷卻后再沾取標本或放置于工作臺上,以防燙死微生物和燒損桌面。
4.由培養基或試管培養物中沾取標本時(shí),培養瓶口、試管口在打開(kāi)后及關(guān)閉前,應于火焰上通過(guò)1 ~2 次,以殺死可能從空氣中落入的雜菌和由培養物而來(lái)的致病菌。打開(kāi)瓶塞或試管塞時(shí),應將棉塞上端夾于手指間適當的位置,不得將棉塞任意放置別處。
5.不染色標本和染色標本觀(guān)察后,應立即投入消毒液內滅菌。
6.使用過(guò)玻片,務(wù)須徹底消除玻片上的染色細菌后再用,否則再次使用時(shí)可能做出錯誤診斷。
舉例:一般藥廠(chǎng)的微生物實(shí)驗室如何配置?
1.環(huán)境按藥典要求限度實(shí)驗室,室內環(huán)境應為萬(wàn)級局部為百級。那么得需要建立一個(gè)萬(wàn)級的潔凈區,這是必須的,那么局部百級的話(huà),可以通過(guò)百級層流臺來(lái)實(shí)現。
2 進(jìn)行限度實(shí)驗和陽(yáng)性對照實(shí)驗的話(huà),用到菌種,進(jìn)行菌種保藏的相關(guān)設施。如冰箱,玻璃管,接種環(huán),試管架等需齊備。
3 就是稀釋時(shí),需要移液槍?zhuān)渖细鞣N規格的吸量管等。
4 限度實(shí)驗一般是要做革蘭氏染色的,準備一臺顯微鏡(光學(xué)鏡即可)及相關(guān)設備。
5 既然涉及到菌種了,那么滅菌就是必須得了。如果用量小的話(huà),那么一個(gè)小的滅菌鍋就夠了,如果做得多的話(huà),好還是買(mǎi)自動(dòng)化的大容量滅菌柜。另外,平板等玻璃儀器滅菌用的烘箱一臺。儲存培養基的恒溫恒濕箱一臺,用于培養細菌霉菌的恒溫培養箱各一臺,有條件再多買(mǎi)一臺陽(yáng)性對照的專(zhuān)用培養箱。
6 各類(lèi)培養基和革蘭氏染色的藥品。
7 平板、錐形瓶等玻璃儀器,酒精燈,平板、吸量管用的滅菌桶。
8 如果要做液體類(lèi)樣品的限度的話(huà),還需過(guò)濾器,及真空抽濾系統一套(儲水罐、真空泵)。
9 如果用到一些須先溶解再滅菌的培養基的話(huà),還得準備一臺電磁爐。
10 還有一些取樣用的相關(guān)器具,根據實(shí)際情況添加。